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ACQUITY UPLCTM 操作规程
2013-09-25 17:36   审核人:

 ACQUITY UPLCTM 操作规程

.开机程序

1. 首先制备新鲜流动相和清洗液(详见细则)

2. 打开网络集线器电源

3. 打开计算机电源,进入Windows操作系统

4. 打开BSMSM电源,待通过自检后

5. 登录Empower 2软件,进入运行样品界面

6. 打开控制台界面(图标在SM界面右下角)

7. 进行仪器的 Start up 操作 (详见细则)

8. 设定0.1ml/min-0.2ml/min流速,冲洗检测池

9. 当检测池出口有液体流出后,打开TUV(PDA)检测器电源

10.待检测器通过自检以后,在控制台界面RESET检测器

11.编制仪器方法,监测基线,准备开始 UPLC 分析实验

.开机细则

1. 制备新鲜流动相和清洗液

A. UPLC对流动相的要求

�� 有机溶剂要求用色谱纯(进口名牌最好)

�� 水或缓冲盐溶液要用超纯水(18.2MΩ),当天制备

B.UPLC对洗针液的要求

�� 强洗针液用较高比例的甲醇/水或乙腈/(例如:80/20)

�� 弱洗针液用纯水或含少量甲醇或乙腈的水溶液(例如:10%甲醇溶液)

C.清洗柱塞密封垫(Seal Wash)的溶液

�� 5%-10%甲醇的超纯水

*特别提示: 以上溶剂或溶液均需:

�� 0.22μm的膜过滤并脱气

�� 用洁净的玻璃容器盛放,避免污染

2. UPLC Start Up 操作

A. 首先灌注柱塞杆清洗液(Prime Seal wash)

�� 选择 Control>Prime Sealwash,点击之

�� 至出口管有液体滴出即可停止灌注

*提示:为避免污染,请勿循环使用Seal wash清洗液

B. 第二步湿灌注(Wet Priming)BSM(二元溶剂管理器)

�� 选择 Control>Prime A/B Solvents,点击之

�� 选择 A1(A2)B1 (B2) ,时间设定为3分钟, 点击 start

�� Prime时的流速已设定为:A泵和B泵各4ml/min, 总流速为8mL/min,无需改动

C. 做过BSMwet prime之后(亦可同时进行),要准备SM样品管理器

�� 灌注SM注射器和进样针操作

�� 选择Sample Manager,单击 Control > Prime syringes

�� 选择 “ Sample syringe and wash syringes”

�� Number of cycles中输入要作灌注的次数 (默认值为1)

(建议: 如果更换溶剂,做57次灌注)

�� 单击 OK. 当系统状态是 “Idle(待机),” 就表示灌注做完了

�� 接下来做冲洗进样针

�� 在控制台的Sample Manager窗口,单击Control > Wash Needle,出现Wash Needle对话框

�� 输入需要的强洗针液的体积. 建议值:2000μL

�� 在弱洗针框中输入弱洗针液的体积, 建议值:2000 μL

�� 单击OK. 开始洗针过程

�� 当洗针过程完成时, 回到“Idle”状态

提示: 不要使用缓冲盐作为洗针液

D. 样品制备

�� 用流动相溶样

�� 0.22um样品过滤膜过滤

�� 放入Waters UPLC 适用的样品瓶

提示: 不要使用非Waters指定的样品瓶,以免损坏进样针

.关机操作

�� 用超纯水置换缓冲盐流动相,清洗色谱柱及系统(100倍柱体积)

�� 待系统中缓冲盐冲洗干净,用乙腈/水冲洗系统

�� 用纯有机溶剂(乙腈或甲醇)充满系统

�� 缓慢降低流速至零,关闭TUV/PDA检测器电源,关闭SM,BSM电源.

�� 退出Empower 2软件,E2软件已退出后,关计算机.

提示: 关机操作一定要耐心等待Empower 2软件退出完毕,再关闭Windows,以免出现下次开机登录不上Empower2的问题.

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